Nguyen anh Tuấn, anhtuannguyen0111@yahoo.com, 29a Cao Bá Nhạ quận 1,tp HCM
Hỏi: Thua cac anh chi Bac sy ! Toi ten nguyen anh tuan, nam, 44 tuoi, 70 kg.
Tien su:
- Cach day 4 nam da 1 lan bi bất tỉnh khoang 5 phut, bv nhan dan 115 khg tim duoc nguyen nhan, chup MRI nao ghi ton thuong nao vung chất trắng nghi nhiem KST, thu mau thi duong tinh giun luon, giun dua cho.dieu tri 5 v thuoc Ivermectin 1 lan duy nhat (TS. Hong khoa kst)
- 4 lan bi di ung voi cac thuc an; tàu hủ chén an vói nuoc duong, sua dau nanh mua o ngoai duong, tau hu mieng chien, sua dau nanh Vinasoy. Đa phia chich thuoc solumedrol va khang histamin, nhung sua dau nanh o nha nau uong thi kg bi. Hien tai toi co mot so trieu chung kho chiu nhu sau :
_ Ngua chu yeu tay chan da hon 2 nam, thuong vao buoi chieu, da vung ngua chi noi 1 hoac vai cham li ti, cang gay cang ngua va bi tray da de lai nhung seo tham den xau qua, ngua kg tap trung lai ma rai rac tay chan, it ngua vung lung, nguc, bung hon. Neu cao da thi se noi len lan do da theo dau cao. Khi het ngua thi da vung do tro lai nhu binh thuong neu kg bi gay tray da. Đieu tri o da lieu noi bi eczema nhung kg giam nen thoi.
_ Tai bi ù giong nhu tieng ve keu, ca 2 tai tu sau bi bat tinh. kham TMH uong tang tuan hoan nao kg giam nen kg uong nua ;
_ Nguoi hay met moi, giam su tap trung chu y, giam kha nang lao dong, hay bi choang vang nhe, kho ngu ngon giac, hay cang thang. Kham tam than noi bi tram cam va co uong Zoflot thi giam benh. Hien tai toi kg dung nua;
_ Về da day thi kg dau nhu luc truoc ma an uong vao hay cham tieu, tieu tieu thi binh thuong
_ Dang uong thuoc Stamlo 5 (1/2 vien), concor 5 (1/4 vien), Vasrarel 35 (2 vien)/ngay, uong sau luc bi bat tinh toi gio ( em tu uong vi h.ap hoi tang nhe va nhip tim nhanh, uong thi mach va h.ap ve binh thuong;
_ xet nghiem chuc nang gan, than, bilan mo mau binh thuong. Kg lam cong thuc mau nen kg ro E nao;
_ Xet nghiem 20/4 thi toxocara canis 1,46 (bt < 0,3 OD), san dai cho 0,34 (bt <0,3), giun luon am tinh (toi chi xn 3 loai thoi ).Toi co den kham Ts Hong khoa kst bv Pham ngoc Thach ,bs cho uong 5 vien ivermectin duy nhat, sau do thi trieu chung ngua kg giam ti nao. that su benh lam toi lo lang vi keo dai ma uong thuoc kg giam.
_ toi co doc tat ca cac cau hoi dap cua cac anh chi tren trang web cua vien va lam lieu mua thuoc Niczen uong thu xem sau, moi uong duoc 2 ngay, 4 vien/ngay chia 2 lan. Thuoc uong vao hoi gay choang vang va 2 ngay nay toi bi ngua nhieu hon mac du toi co uong kem Telfast nen phan van qua.( tinh uong 20 ngay).
Kinh thua cac bac sy voi benh su nhu the cho e hoi : Em co bi benh giun dua cho lam cho e bi ngua keo dai nhu vay kg?dieu tri tiep tuc benh em nhu the nao? theo doi trong qua trinh uong thuoc ntn ( lam sau e het ngua, chan bi ngua nhieu nen theo tham xau qua, mat tu tin luon) ve lam sang va can lam sang. Rat mong su quan tam va tra loi giup em. Chan thanh cam on va kinh chuc cac anh chi nhieu suc khoe vathanh cong !
Trả lời:
Chúng tôi trước hết xin chân thành cảm ơn anh chi rất nhiều vì đã cho chúng tôi một phần cần tư vấn rất chi tiết và rất thận trọng ngay cả với sức khỏe bản thân. Chúng tôi đọc thư đầy đủ và tổng hợp các thông tin anh đang có và liệu pháp đang sử dụng trong thời gian qua. Với các xét nghiệm giun sán như thế, liệu trình thuốc mà TS. Hồng đã cho anh điều trị tôi nghĩ là đủ rồi, hơn nữa việc phối hợp nhiều loại thuốc đa hiệu lực trên các cơ chế khác nhau như vậy là rất tốt, song không hề thuyên giảm là điều làm chúng tôi băn khoăn nhất, mặc dù các bệnh ấu trùng giun sán ngõ cụt ký sinh hiện nay đã có báo cáo kháng thuốc với một số loại thuốc (Review 2009), song tại việt Nam, thì vấn đề này còn rất nhạy và chưa có một số liệu báo cáo kháng thuốc nên chúng tôi không nghĩ là không đáp ứng thuốc.
Hơn nữa, anh cũng nên nhớ rằng hiện các xét nghiệm về ELISA chẩn đoán có một tỷ lệ khá cao về dương tính chéo và dương tính giả với một số loại giun tròn đường ruột vốn sống bình thường trong cơ thể chúng ta. Điều tiếp theo là anh chỉ mới xét nghiệm có 3 trong số hàng chục loại giun sán thường gặp ký sinh và gây bệnh trên người nên cũng chưa thể loại trừ hết các bệnh do các tác nhân khác gây nên.
Điểm cần lưu ý hơn, là chúng tôi đề nghị anh nên kiểm tra tổng thể về bilan đường huyết, (gồm có HbA1C, Glucose máu, nước tiểu toàn phần, bilan mỡ máu, và tổng thể tim mạch) lại một lần nữa vì trên những cơ địa bị đái tháo đường có thể bị các tác nhân ký sinh trùng dai dảng và nhiễm trùng cơ hội với một số tác nhân khác như nấm, ghẻ chó, giun lươn, giun đầu gai,…Do đó, chúng tôi khuyên bạn nên kiểm tra các tác nhân này nữa nhé.
Ngứa, sẩn ngứa, mày đay,…chỉ là triệu chứng của hàng trăm thứ bệnh chứ không phải là bệnh. Nên chúng ta chưa vội kết luận là có phải tác nhân giun đũa chó mèo gây ra hay không mà phải thận trọng tìm tất cả thì mới mong giải quyết được căn nguyên. Mọi chi tiết bạn có thể gởi mail trực tiếp đến huynhquangimpe@yahoo.com hoặc số điện thoại di động 0905 103 496 của bác sĩ Huỳnh Hồng Quang để giải thích chi tiết hơn.
Thân chúc anh khỏe và máu chóng có thông tin về bệnh tật để điều trị dứt điểm!
Minh Huy, minhhuy070@gmail.com, Tấn Phú, Hồ Chí Minh
Hỏi: Chào bác sĩ, cháu bị ngứa trên lông mu, lông đầu, lông nách, giờ chuyển qua mặt tiết bả nhờn, nổi mụn đỏ ngứa lắm. trên lông mu và trên da đầu cháu có con gì bò và cắn rất ngứa. Cháu đi bệnh viện da liễu bác sĩ kêu bị rận lông mu sợi nhiễm và viêm nang lông, cho thuốc về uống nhưng không thấy hết, chỉ đỡ viêm nang lông nhưng ký sinh trùng trên vẫn còn. rất ngứa về đêm, ngứa ngáy làm ảnh hưởng đến việc học tập, đi làm và cuộc sống của cháu. đi da liễu mà không bớt nên cháu mất lòng tin vào bệnh viện và giờ cháu không biết điều trị ở đâu luôn đó. Cháu ở Hồ Chí Minh xin bác sĩ chỉ dẫn cho cháu diều trị ở đâu cho hết bệnh để cháu trở lại cuộc sống bình thường như trươc. Cháu bị hơn nữa năm nay rồi, cám ơn bác sĩ nhiều.
Trả lời: khoan vội bi quan và phán vội là mất lòng tin đến bệnh viện da liễu nhé vì lỡ may chúng tôi tư vấn không đúng với bạn nữa lại mất lòng tin thì chết với bạn nhỉ? Nói đùa chút thôi. Theo qua thư bạn mô tả chúng tôi đòng ý với chẩn đoán của bệnh viện da liễu TP.HCM là bệnh rận mu, nhưng có lẽ do bệnh viện họ có quá nhiều bệnh nhân khám cùng một ngày nên không đủ thời gian tư vấn và điều trị cho bạn một cách thấu đáo nhất, nên bệnh hay bị tái phát và diễn tiến không dứt.
Về bệnh này có thể do nhiều tác nhân, nhưng bạn không nên chủ quan đôi khi chúng ta bị nhiễm loại ghẻ chó Demodex canis nữa đó, do vậy khi điều trị và xét nghiệm nên làm thêm con này và thường phải do các bác sĩ chuyên khoa da liễu hoặc chuyên khoa ký sinh trùng chỉ định phác đồ điều trị thích hợp. hơn nữa, về mặt điều trị không thể quên khâu chăm sóc vệ sinh toàn thân cùng với quần áo, chăn màn,…của bạn. Để biết thêm chi tiết về câu hỏi của bạn, có thể bạn truy cập vào trang website của Viện http://www.impe-qn.org.vn của chúng tôi đểtìm lấy phác đồ và nguyên tắc điều trị một cách tổng thể nhất của căn bệnh khó chịu này.
Thân chúc bạn khỏe và hy vọng sẽ yêu mên chúng tôi!
Huỳnh Thị Thúy Diễm, huynhdiemtp@gmail.com, Trường THCS Trần Phú, S.Hinh, P.Yên.
Hỏi: Con trai tôi năm nay 13 tuổi, đang học lớp 6. Một tháng nay cháu có triệu chứng bị ngứa vào khoảng 19 giờ tối, khi ngứa nổi mề đay thành cục lớn. Tôi cho cháu uống thuốc lọc gan, bệnh giảm được một ít. Mấy hôm nay ngứa lại nhưng lại nổi thành lằn dài. Có phải triệu chứng của bệnh giun sán không. Ngày thứ 7 và CN bệnh viện có làm việc cả ngày như những ngày khác không? Bệnh nhân ở xa có cần phải đăng kí số khám bệnh trước không? Rất mong nhận được lời đáp sớm nhất. Chân thành cảm ơn. Chúc sức khỏe.
Trả lời : Với các phần mô tả của chị trên cơ thể cháu, thật sự chúng tôi kjhoong thể nghĩ ra là cháu có khả năng bị bệnh gì, có thể là hội chứng ấu trùng di chuyển do các sán non của giun sán di chuyển trong da niêm mạc hoặc trong phủ tạng,…Để biết chi tiết và chính xác bệnh tình của cháu, chúng tôi khuyên chị nên đến khám tại các cơ sở chuyên khoa về da liễu, hoặc ký sinh trùng để tại đó họ có thể khám và xét nghiệm cũng như điều trị thấu đáo nhé.
Phòng khám của Viện sẽ khám tất cả các ngày trong tuần, cả ngày thứ 7 và chủ nhật, có thể chị nhờ đăng ký trước để khỏi chờ đợi. Thân chúc gia đình chị khỏe!
Nguyenvanson, viethan1191@yahoo.com.vn, dong son thanh hoa
Hỏi: Toi bị 1 vet tham tim, giong nhu bi va dap, hinh tron, bang mieng chen, no len o dui, khoang 1 tuan roi tu nhien mat, 1, hoac 2 ngay sau no lai bi o tay, vai ngay roi lai mat, no lai bi o dui, cu lap di lap lai nhu vay da 2 thag nay roi, ko dau, va cung ngua, toi ko biet la chieu chung cua bienh gi, mong trung tam tra loi, toi xin cam on.
Trả lời : Để biết đó có phải là giun sán hay bệnh gì thì e rằng anh nên đến khám và xét nghiệm cũng như các thầy thuốc lâm sàng sẽ xem các hình ảnh tổn thương cơ bản để điều trị thích hợp. theo ghi nhận qua thư chúng tôi cũng hơi nghĩ về bệnh do các ấu trùng giun hoặc sán di chuyển dưới da từng đợt (intermittent cutaneouslarval migrans). Anh có thể đến Viện Sốt rét KST-CT Quy Nhơn xin khám và điều trị, mau khỏi bệnh nhé!
Huỳnh Thị Vân Anh, sanganhbao@yahoo.com.vn, 156 Hùng Vương TX B. Hồ - ĐakLak
Hỏi: Khi đi xét nghiệm tại bệnh viện tôi bị sán chó và đã uống thuốc theo đơn thuốc của bác sĩ, toa thuốc uống 21 ngày sau khi ngưng thuốc tôi vẫn bị ngứa lại. Trong khi đó bác sĩ ghi tái khám sau ba tháng. Như vậy tôi phải làm sao? đi kiểm tra lại hay đợi tới ba tháng nữa.
Trả lời :Phải nói rằng câu hỏi của chị rất hay và trùng lắp rất nhiều bệnh nhân đã từng đặt câu hỏi, chúng tôi lâu nay rất băn khoăn để tư vấn cho bệnh nhân vì phần lớn bệnh nhân của Viện đến từ các tỉnh khác nên rất xa. Do vậy mỗi lần tái khám sẽ tốn rất nhiều thời gian, công sức và tiền. Do vậy vừa phù hợp với mặt chẩn đoán và điều trị khoa học vừa phù hợp với kinh tế cho bệnh nhân, chúng tôi thường có lịch hẹn tái khám sau 3 tháng 6 tháng hoặc 9 tháng, có khi lên đến 12 tháng hoặc hơn.
Song, khi chưa đến lịch tái khám mà vừa dứt thuốc đã ngứa trở lại là thường gặp vì đó là thường quy hay gặp trên bệnh nhân nhiễm giun sán bởi lẻ có giai đoạn sau khi dùng thuốc sẽ ly giải độc tố và ly giải các thành phần sau khi tác nhân gây bệnh chết tiết ra kích thích các cơ quan cảm giác thần kinh, hoặc có thể tồn tại lại một lượng ấu trùng còn nhỏ sẽ từ hết sau đó. Vẫn có những trường hợp chúng tôi gặp là bệnh nhân lại ngứa nhiều hơn sau khi dùng thuốc, đó có thể là phản ứng dội (rebound reaction) hoặc phản ứng Jarish – Herzeimer sau khi dùng thuốc giết chết một lượng lớn giun sán xảy ra như một số bệnh truyền nhiễm khác sau khi điều trị.
Trong trường hợp của bạn nếu ngứa sau 1 tuần không khỏi kể từ khi dứt thuốc đợt một thì có thể đến khám lại, hoặc để bác sĩ bổ sung thêm thuốc mà không cần thiết xét nghiệm lại lệ thuộc vào kinh nghiệm lâm sàng của từng bác sĩ.
Thân chúc bạn khỏe !
Truong hien, truonghien1981@yahoo.com, daknong
Hỏi:Chào bác sĩ, Bác sĩ cho chau hoi ở viện ki sinh trung Quy Nhơn ngoai khoa giun san con có các khoa khác liên quan đến cơ xương khớp không.
Trả lời : Trong Viện Sốt rét KST-CT Quy Nhơn không có khoa chuyên khoa về xương khớp, mà phần lớn bệnh nhân thuộc về chuyên khoa xương khớp đến đây được các y bác sĩ tư vấn và chuyển sang Bệnh viện Chấn thương chỉnh hình (đối diện Viện Sốt rét KST-CT Quy Nhơn) đây là nơi chuyên khoa về xương khớp để bệnh nhân tránh mất thời gian và vừa tôn trọng chuyên khoa lẫn nhau.
Nguyễn Thị Trinh, trinhlun89gl@gmail.com, gia lai
Hỏi: Thưa bác sỹ cho cháu hỏi cháu có bảo hiểm ở BVĐK Hoàn Mỹ Đà Nẵng vậy cháu khám tại BV ký sinh trùng Quy nhơn có dùng được bảo hiểm này ko và nếu được là bao nhiêu phần trăm ạ? Cháu xin cảm ơn ạ.
Trả lời : Bảo hiểm như thế cháu vẫn đến khám tại Viện Sốt rét KST-CT Quy Nhơn được nhưng chỉ thanh toán được 50% theo quy định bạn nhé.
Phạm văn đại, phamvandaidtt46dh1@gmail.com.vn, lo 6, thượng lý, HB, hải phòng
Hỏi: xin chào ban quản trị, em năm nay 25 tuổi. Vừa rồi, mấy đứa bạn rủ đi ăn thịt rắn, em có uống rượu tiết rắn, mật rắn. Sau khi uống xong thì người ê ẩm, có cảm giác mỏi chân tay, đau đầu sau vài ngày thì có thấy đỡ hơn. Xin cho hỏi em có thể bị nhiễm loại giun sán gì không hay rượu rắn nó độc
Trả lời: Điều này khó nói là em sẽ bị nhiễm con giun sán nào không vì chúng tôi không biết trước đó con rắn có bị nhiễm tác nhân nào không, nếu để xác định bạn có nhiễm con giun sán gì không, có lẽ cách tốt nhất là bạn nên đến khám nơi có chuyên khoa về giun sán như Viện Sốt rét KST-CT TƯ tại Hà Nội vì bạn đang ở Hải Phòng, còn nếu bạn về Quy Nhơn, bạn có thể đến khám và điều trị tại Viện chúng tôi. Chân thành cảm ơn bạn về câu hỏi thú vị này.
Nguyễn Hạnh, nguyenhanh200890@gmail.com, Bình Định
Hỏi: Cho em hỏi ở viện có tuyển cán bộ ngành cử nhân sinh học vào làm không. Nếu có thì đợt tuyển là khi nào, xin cảm ơn.
Trả lời: Cử nhân sinh học là một trong những nhóm cán bộ mà Viện từ lâu nay đang rất cần để thực hiện các nhiệm vụ chuyên môn tại các khoa phòng và ngay cả tại thực địa như thực hiện công tác phòng chống vector hay nghiên cứu sinh học phân tử, ....Bạn có thể nộp đơnvào phòng tổ chức cán bộ của Viện, để khi có chỉ tiêu tuyển dụng, chúng tôi sẽ tuyển dụng bạn nhé.Xin cảm ơn bạn!
Nguyễn Thị Xuân Lộc, hoa_buon22@yahoo.com, Pleiku-Gia Lai
Hỏi: Đi khám cần mang theo giấy tờ gì? Thủ tục ra sao?
Trả lời: Nếu bạn đi khám không có bảo hiểm thì không cần mang theo gì cả mà chỉ mang theo tiền. Nếu có Bảo hiểm thì nên mang theo bảo hiểm và chứng minh nhân dân hoặc hộ chiếu. Nếu là trẻ em phải có giấy khai sinh,...thẻ học sinh,...mọi thủ tục liên quan đến bảo hiểm, chị có thể gọi điện thoại trực tiếp đến chị Nguyễn Thị Thu Hồng, y tá trưởng của phòng khám bệnh của Viện Sốt rét KST-CT Quy Nhơn qua số điện thoại 0985862638 để hỏi rõ hơn về thủ tục thanh toán chị nhé. Chúc chị khỏe!
Long, khaclong@gmail.com, Quốc Oai - Hà nội
Hỏi: tôi muốn đăng ký tiếp chất lượng của muối iot thi cần đăng ký qua ai? xin cảm ơn!
Trả lời : hình như câu hỏi này không thuộc về chức năng và lĩnh vực chuyên ngành của Viện chúng tôi, xin anh chi tìm hiểu thêm về các cơ quan khác để đăng ký chất lượng. Chúc chị sớm tìm ra địa chỉ tin cậy!
Dang Thi Nguyet, dr.nguyet78@yahoo.com, 21-Nguyen Thi Hue, KP 5, P.Quoc- K. Giang
Hỏi: Xin chao! Hom nay la lan dau tien em vao trang web nay, em rat thich, em la bac sy da khoa, ra truong gan muoi nam, em chua co dieu kien di hoc sau dai hoc vi nhieu ly do, kien thuc cua em hien da rat han che, em muon hoi ve y nghia cua Test huyết thanh chẩn đoán sốt xuất huyết, vi dang ngoi o phòng khám nen benh sot xuat huyet rat nhieu, em da tim doc cau hoi nay tren mang nhung cach tra loi rat don gian, em muon duoc biet ky hon, rat momg nhan duoc cau tra loi som vi rat can cho cong tac kham va dieu tri hang ngay cua em. xin cam on.
Trả lời : Cảm ơn bạn đã có những nhận xét rất tốt đẹp về trang tin điện tử của Viện minh, liên quan đến câu hỏi của bạn, chúng tôi muôn chia sẻ với bạn về một số xét nghiệm huyết thanh chẩn đoán sốt xuất huyết hiện nay đang có trên thị trường và ứng dụng trong chẩn đoán bệnh sốt xuất huyết Dengue tại Việt Nam.
1. Thông tin về test SD-Bioline Dengue NS1Ag
Kit phát hiện kháng nguyên NS1 trong hỗ trợ chẩn đoán bệnh sốt xuất huyết. NS1 có thể được phát hiện từ sau 1 ngày phát sốt. Mẫu bệnh phẩm là huyết tương, huyết thanh và máu toàn phần. Thời gian đọc kết quả là 15 -20 phút, độ nhạy 92.8%, độ đặc hiệu 98.4% do hãng sản xuất của Hàn Quốc. Virus sốt xuất huyết (vi rút Dengue) truyền qua muỗiAedes aegypti vàAedes albopictus lưu hành rộng rãi trong các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới của thế giới. Có 4 typ huyết thanh được biết đến là 1, 2, 3 và 4. Ở trẻ em nhiễm vi rút thường gây bệnh không có biểu hiện lâm sàng hoặc gây sốt tự hạn chế. Tuy nhiên nếu người bệnh bị nhiễm vi rút lần hai với typ huyết thanh khác thì thường bệnh sẽ nặng hơn, có sốt xuất huyết Dengue hoặc có hội chứng sốc Dengue. Sốt xuất huyết được coi là bệnh do vi rút lây truyền qua động vật chân đốt quan trọng nhất đối với con người vì sự hoành hành và tỷ lệ tử vong mà chúng gây ra. NS1 là 1 glycoprotein có tính bảo tồn cao, tồn tại trong huyết thanh của bệnh nhân nhiễm vi rút Dengue với nồng độ cao tại giai đoạn lâm sàng sớm của bệnh.Kháng nguyên NS1 được tìm thấy từ ngày thứ nhất đến ngày thứ 9 sau khi sốt trong mẫu của bệnh nhân nhiễm virus Dengue nguyên phát hoặc thứ phát. Thường thì kháng thể IgM không thể phát hiện được cho tới ngày thứ 5 đến ngày thứ 10 sau khi ốm trong trường hợp nhiễm virus tiên phát, và cho tới ngày thứ 4 đến ngày thứ 5 sau khi ốm trong trường hợp nhiễm virus thứ phát. Trong nhiễm virus tiên phát, kháng thể IgG xuất hiện vào ngày thứ 14 và tồn tại suốt đời. Nhiễm trùng thứ phát cho thấy kháng thể IgG tăng trong 1-2 ngày sau khi có triệu chứng và tạo đáp ứng IgM sau nhiễm vi rút 20 ngày .
Mục đích sử dụng:
Xét nghiệm nhanh SD Bioline Dengue Duo là thử nghiệm sắc ký miễn dịch một bước, dùng để phát hiện kháng nguyên vi rút Dengue NS1 và phân biệt kháng thể IgG và IgM kháng vi rút Dengue trong huyết thanh, huyết tương hay máu toàn phần người. Xét nghiệm SD Bioline Dengue Duo này gồm 2 dụng cụ xét nghiệm (dụng cụ phía bên trái: xét nghiệm kháng nguyên Dengue NS1, dụng cụ phía bên phải: xét nghiệm Dengue IgG/IgM).
Xét nghiệm nhanh kháng nguyên Dengue NS1 bên trái là thử nghiệm sắc ký miễn dịch một bước được thiết kế để xác định định tính kháng nguyên vi rút Dengue NS1 trong huyết thanh, huyết tương, hay máu toàn phần người để chẩn đoán sớm nhiễm vi rút Dengue cấp tính. Dụng cụ xét nghiệm bao gồm thanh màng, được phủ trước với nguyên liệu bắt giữ là kháng thể kháng kháng nguyên Dengue NS1 trên vùng vạch thử. Kháng thể kháng kháng nguyên Dengue NS1 - cộng hợp keo vàng và mẫu huyết thanh, huyết tương hay máu toàn phần di chuyển sắc ký dọc trên màng và tới vùng vạch thử (T) và tạo nên vạch nhìn thấy do tạo thành phức hợp phân tử vàng kháng thể - kháng nguyên – kháng thể. Xét nghiệm nhanh Dengue IgG/IgM bên phải là thử nghiệm sắc ký miễn dịch pha rắn, dùng để phát hiện nhanh, định tính và phân biệt kháng thể IgG và IgM kháng virus Dengue trong huyết thanh, huyết tương hay máu toàn phần người. Xét nghiệm này được sử dụng để trợ giúp trong việc chẩn đoán cơ sở giữa nhiễm vi rút Dengue tiên phát và thứ phát. Xét nghiệm SD BIOLINE Dengue Duo này chỉ cung cấp kết quả sơ bộ. Do đó, việc phân lập vi rút, tìm kháng nguyên trong các tổ chức mô, RT-PCR và các thử nghiệm huyết học như thử nghiệm ức chế ngưng kết hồng cầu, phương pháp chẩn đoán thay thế đặc hiệu hơn phải được sử dụng để khẳng định nhiễm vi rút Dengue.
Theo cách truyền thống, chẩn đoán huyết học cho nhiễm vi rút Dengue cấp tính dựa trên sự tăng kháng thể kháng vi rút Dengue gấp 4 lần trong cặp huyết thanh giai đọan cấp-giai đoạn phục hồi của mỗi bệnh nhân. Thử nghiệm ức chế ngưng kết hồng cầu là thử nghiệm hay dùng nhất trong chẩn đoán sốt xuất huyết. Xét nghiệm nhanh và tin cậy nhiễm vi rút tiên phát và thứ phát của sốt xuất huyết là cần thiết để quản lý bệnh nhân. Nhiễm vi rút Dengue tiên phát thường kèm theo sốt vừa đến cao, đau đầu, đau cơ và ban da. Đáp ứng miễn dịch tạo ra kháng thể IgM từ ngày thứ 3 đến ngày thứ 5 kể từ khi có triệu chứng và tồn tại trong vòng 30-60 ngày. Kháng thể IgG xuất hiện vào ngày thứ 14 và tồn tại cả đời. Nhiễm vi rút thứ phát thường gây ra sốt cao và trong nhiều trường hợp gây xuất huyết và ảnh hưởng đến hệ tuần hoàn máu. Nhiễm vi rút thứ phát làm tăng IgG trong vòng 2 ngày sau khi có triệu chứng và tạo đáp ứng IgM sau nhiễm vi rút 20 ngày.
Nguyên lý: Cửa sổ đọc kết quả của dụng cụ xét nghiệm kháng nguyên Dengue NS1 bao gồm 2 vạch được phủ trước “T” (vạch thử kháng nguyên Dengue NS1) và “C” (vạch chứng). Cả vạch chứng và vạch thử trong cửa sổ đọc kết quả đều không nhìn thấy được trước khi nhỏ mẫu. Vạch chứng để kiểm tra quy trình xét nghiệm và luôn luôn xuất hiện nếu quy trình xét nghiệm thực hiện đúng. Xét nghiệm Dengue NS1 có thể xác định kháng nguyên virus Dengue NS1 trong mẫu huyết thanh, huyết tương hoặc máu toàn phần với độ nhạy và độ đặc hiệu cao.
Dụng cụ xét nghiệm Dengue IgG/IgM được thiết kế để phát hiện đồng thời và phân biệt các kháng thể IgG và IgM đối với vi rút Dengue trong huyết thanh hoặc huyết tương người. Xét nghiệm này có thể phát hiện được cả 4 typ huyết thanh Dengue do sử dụng hỗn hợp các protein vỏ Dengue tái tổ hợp. Dụng cụ xét nghiệm Dengue IgG/IgM có 3 vạch được phủ trước: “G” (vạch thử IgG Dengue), “M” (vạch thử IgM Dengue) và “C” (vạch chứng) trên bề mặt của màng. Tất cả các vạch trong cửa sổ đọc kết quả đều không nhìn thấy được trước khi nhỏ mẫu. Vạch chứng để kiểm tra quy trình xét nghiệm. Vạch chứng luôn luôn xuất hiện chứng tỏ quy trình xét nghiệm thực hiện đúng và các thuốc thử trên vạch chứng phản ứng tốt. Vạch đỏ tía “G” và “M” có thể nhìn thấy tại cửa sổ đọc kết quả nếu có đủ kháng thể IgG và IgM kháng vi rút Dengue trong mẫu thử. Nếu kháng thể IgG và IgM kháng vi rút Dengue không có trong mẫu thử thì không xuất hiện vạch mầu tại “G” và “M”.
Khi mẫu xét nghiệm được nhỏ vào giếng mẫu, các kháng thể kháng Dengue IgG và IgM trong mẫu thử sẽ phản ứng với cộng hợp vàng- protein vỏ vi rút Dengue tái tổ hợp và hình thành phức hợp kháng nguyên-kháng thể. Phức hợp này di chuyển dọc theo chiều dài của dụng cụ xét nghiệm bằng tác động mao dẫn và sẽ gắn với kháng thể kháng IgG hoặc IgM người tương ứng tại 2 vạch thử trên dụng cụ xét nghiệm và tạo ra vạch màu.
Các nguyên vật liệu và hoạt chất của các thành phần chính (10 xét nghiệm/kít)
Bộ xét nghiệm chẩn đoán SD BIOLINE Dengue Duo gồm các thành phần sau:
1) Dụng cụ xét nghiệm Dengue NS1 Ag và Dengue IgG/IgM
2) Dung môi thử nghiệm cho xét nghiệm Dengue IgG/IgM
3) Pipet mao dẫn 10l cho xét nghiệm Dengue IgG/IgM
4)Ống nhỏ giọt dùng 1 lần cho xét nghiệm Dengue NS1 Ag
5)Tờ hướng dẫn sử dụng
Hoạt chất của các thành phần chính:
1. Một khay xét nghiệm Dengue NS1 Ag bao gồm:
. Cộng hợp vàng (thành phần chính): kháng thể đơn dòng từ chuột kháng Dengue NS1-keo vàng (0.270.05g).
. Vạch thử (thành phần chính): kháng thể đơn dòng từ chuột kháng Dengue NS1- (0.720.14g)
. Vạch chứng (thành phần chính): huyết thanh dê kháng IgG chuột (0.720.14g).
2. 1 khay xét nghiệm Dengue IgG/IgM bao gồm:
. Cộng hợp vàng (thành phần chính): protein vỏ của vi rút Dengue tái tổ hợp-keo vàng (10,2g).
. Vạch thử “G” (thành phần chính): kháng thể đơn dòng từ chuột kháng IgG người (5 1g).
. Vạch thử “M” (thành phần chính): kháng thể đơn dòng từ chuột kháng IgM người (5 1g).
. Vạch chứng (thành phần chính): IgG từ thỏ kháng Dengue (2,5 0,5g).
Dung môi thử nghiệm bao gồm: 100 mM đệm phosphate (5 ml), natri azide (0.01%w/w)
3. Bảo quản và tính ổn định của Kít
1) Để có kết quả tốt nhất, cần phải tuân thủ theo hướng dẫn.
2) Tất cả các mẫu xét nghiệm phải được xử lý như mẫu nhiễm vi rút tiềm ẩn.
3) Dụng cụ XN phải được bảo quản ở nhiệt độ 1-30oC. Không bảo quản trong tủ lạnh.
4) Dụng cụ xét nghiệm nhạy cảm với độ ẩm cũng như nhiệt độ.
5) Không mở hoặc lấy dụng cụ XN ra khỏi túi nhôm hàn kín khi không dùng ngay. Thực hiện xét nghiệm ngay sau khi lấy dụng cụ ra ngoài túi nhôm.
6) Không sử dụng khi hết hạn dùng.
7) Không sử dụng dụng cụ xét nghiệm khi túi nhôm đựng bị hỏng hoặc hở.
8) Các thành phần (dụng cụ xét nghiệm và dung môi) trong kít phải đạt chất lượng. Không trộn lẫn thành phần giữa các lô khác nhau.
9) Dung môi thử nghiệm chứa Natri azit là chất bảo quản ở nồng độ thấp. Natri azit độc và phải được xử lý cẩn thận, tránh tiếp xúc lên da hoặc đường tiêu hóa.
10) Hạn dùng của SD BIOLINE Dengue Duo: 24 tháng kể từ ngày sản xuất.
Thu thập, cất giữ mẫu thử và thận trọng
Máu toàn phần: Lấy máu toàn phần bằng bơm tiêm vào tube đựng (chứa các chất chống đông như Heparin, EDTA và Natri citrat). Nếu mẫu máu chưa được sử dụng ngay, thì phải để trong tủ lạnh 2- 80C. Khi bảo quản ở 2-80C, mẫu máu nên được sử dụng trong vòng 3 ngày. Nếu cất giữ lâu hơn 3 ngày, thì mẫu thử phải được làm đông băng. Các mẫu nên đưa về nhiệt độ phòng (1-300C) trước khi sử dụng. Dùng các mẫu máu có thời gian cất giữ lâu hơn 3 ngày có thể gây phản ứng không đặc hiệu.
Huyết thanh hoặc huyết tương: Huyết tương:Lấy máu toàn phần vào tube đựng (chứa chất chống đông như Heparin, EDTA và Natri citrat) bằng bơm tiêm và sau đó ly tâm máu để thu mẫu huyết tương. Huyết thanh: Lấy máu toàn phần vào tube đựng (không chứa chất chống đông như Heparin, EDTA và Natri citrat) bằng bơm tiêm, để yên trong vòng 30 phút cho máu đông và sau đó ly tâm để thu mẫu huyết thanh là phần dung dịch nổi.
Nếu mẫu huyết thanh hoặc huyết tương không để xét nghiệm ngay thì phải để trong tủ lạnh 2- 80C. Nếu lưu giữ lâu hơn 2 tuần thì mẫu thử phải được làm đông băng. Các mẫu nên đưa về nhiệt độ phòng (1-300C) trước khi sử dụng. Các mẫu huyết thanh hoặc huyết tương chứa kết tủa có thể cho kết quả không đúng. Các mẫu này phải được làm trong trước khi xét nghiệm.
Thận trọng:
+Các chất chống đông như heparin, EDTA, và Natri citrat không ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.
+Các mẫu có ly giải máu, chứa các yếu tố thấp khớp, mỡ máu, yếu tố vàng da có thể dẫn đến kết quả sai.
+Sử dụng pipet mao quản hoặc đầu côn riêng biệt cho từng mẫu xét nghiệm để tránh làm nhiễm chéo giữa các mẫu và có thể gây ra kết quả sai.
Cảnh báo
+Chỉ dùng trong chẩn đoán in vitro. Không tái sử dụng dụng cụ xét nghiệm.
+Không ăn và hút thuốc khi đang xử lý mẫu thử
+Mang găng tay bảo vệ khi xử lý mẫu, sau đó rửa sạch tay.
+Tránh làm bắn tung tóe hoặc tạo luồng khí.
+Dùng chất tẩy trùng thích hợp để làm sạch các vết vấy bẩn
+Khử trùng và lọai bỏ tất cả các mẫu xét nghiệm, bộ xét nghiệm phản ứng và các nguyên liệu nhiễm trùng tiềm ẩn vào trong thùng chứa rác thải sinh học nguy hiểm.
+Không dùng kít thử khi bao gói hỏng hoặc mối hàn hở.
+Phải tuân thủ tuyệt đối hướng dẫn sử dụng để có kết quả chính xác.
Quy trình xét nghiệm
SD Bioline Dengue NS1 Ag
1. Lấy dụng cụ xét nghiệm ra khỏi túi nhôm và đặt lên mặt khô, phẳng
2. Dùng ống nhỏ giọt cung cấp trong kít thử, nhỏ 3 giọt mẫu thử vào giếng mẫu (S)
3. Khi test thử bắt đầu hoạt động, bạn sẽ nhìn thấy màu đỏ tía dịch chuyển dọc cửa sổ đọc kết quả ở giữa dụng cụ xét nghiệm.
4. Đọc kết quả trong vòng 1520 phút.
Kết quả dương tính sẽ không thay đổi khi đã được thiết lập tại 1520 phút. Tuy nhiên, để tránh bất kỳ kết quả sai nào, không nên đọc kết quả sau 20 phút.
SD Bioline Dengue IgG/IgM
1) Để tất cả các thành phần của kít và mẫu xét nghiệm ở nhiệt độ phòng trước khi làm xét nghiệm.
2) Lấy dụng cụ xét nghiệm ra khỏi túi nhôm và đặt lên mặt khô, phẳng
3)Sử dụng pipet mao quảnDùng pipet mao quản loại 10l lấy 10l mẫu tới vạch đen và nhỏ vào giếng mẫu hình vuông ký hiệu “S”
4) Nhỏ 4 giọt (khoảng 90-120l) dung môi thử nghiệm vào giếng dung môi hình tròn.
5) Đọc kết quả trong vòng 1520 phút.
Chú ý:Không đọc kết quả sau 20 phút. Đọc quá muộn có thể cho kết quả sai.
Nhận định kết quả
SD Bioline Dengue NS1 Ag
1) Âm tính: Chỉ nhìn thấy vạch chứng (C) trong cửa sổ kết quả
2) Dương tính: xuất hiện 2 vạch màu (vạch “T” và vạch “C”) trong cửa sổ kết quả bất kể vạch nào xuất hiện trước
3) Không có giá trị: nếu vạch màu không nhìn thấy trong cửa sổ đọc kết quả sau khi tiến hành xét nghiệm, kết quả là không có giá trị. Hướng dẫn có thể không được tuân thủ làm theo, hoặc dụng cụ bị hỏng. Mẫu nên dược xét nghiệm lại.
SD Bioline Dengue IgG/IgM
1) Âm tính
Chỉ nhìn thấy vạch chứng (C) trên dụng cụ xét nghiệm. Không phát hiện kháng thể IgG và IgM. Xét nghiệm lại trong vòng 3-5 ngày nếu nghi ngờ bị nhiễm sốt xuất huyết.
2) IgM dương tính
Xuất hiện vạch chứng (C) và vạch IgM (M) trên dụng cụ xét nghiệm, tức là dương tính đối với kháng thể IgM kháng vi rút Dengue. Điều này chứng tỏ có nhiễm vi rút Dengue tiên phát.
3) IgG dương tính
Xuất hiện vạch chứng (C) và vạch IgG (G) trên dụng cụ xét nghiệm, tức là dương tính đối với kháng thể IgG. Điều này chứng tỏ có nhiễm vi rút Dengue trước đó hoặc nhiễm vi rút Dengue thứ phát.
4) IgG và IgM dương tính
Xuất hiện vạch chứng (C), vạch IgM (M) và vạch IgG (G) trên dụng cụ xét nghiệm, tức là dương tính đối với cả 2 kháng thể IgM và IgG. Điều này chứng tỏ có nhiễm vi rút Dengue tiên phát muộn hoặc thứ phát sớm.
5) Kết quả không có giá trị:
Kết quả không có giá trị nếu vạch chứng không xuất hiện vạch. Lượng mẫu xét nghiệm không đủ hoặc kỹ thuật thực hiện sai là nguyên nhân cơ bản làm vạch chứng không xuất hiện. Phải làm lại xét nghiệm trên dụng cụ xét nghiệm mới.
Giới hạn của xét nghiệm
1) Kết quả âm tính có thể xuất hiện nếu số lượng kháng nguyên vi rút sốt xuất huyết NS1 trong mẫu bệnh phẩm dưới giới hạn phát hiện của xét nghiệm hoặc kháng nguyên được phát hiện không có mặt tại giai đoạn bệnh khi thu thập mẫu.
2) Kết quả âm tính không loại trừ nhiễm vi rút mới xảy ra.
3) Sự có mặt của kháng nguyên NS1 phát hiện được có thể là dương tính với nhiễm vi rút sốt xuất huyết Dengue giai đoạn sớm. Cũng giống như tất cả các xét nghiệm chẩn đoán, mọi kết quả phải được xem xét cùng với các thông tin lâm sàng khác có được do bác sỹ điều trị.
4) Trong nhiễm vi rút sớm hoặc nhiễm vi rút thứ phát, mức kháng thể IgM có thể phát hiện được là rất thấp. Một số bệnh nhân có thể không sinh mức kháng thể có thể phát hiện được trong vòng 7-10 ngày đầu sau khi nhiễm. Nếu có triệu chứng lâm sàng, bệnh nhân nên được xét nghiệm lại trong vòng 3-4 ngày sau xét nghiệm thứ nhất.
5) Phổ biến có phản ứng huyết thanh chéo trong nhóm Flavivirus (vi rút sốt xuất huyết, vi rút viêm não St. Louis, vi rút viêm não Nhật Bản, vi rút West Nile và vi rút sốt vàng).
Kiểm định chất lượng nội bộ
SD Bioline Dengue NS1 Ag có vạch thử và vạch chứng trên bề mặt khay nhựa. Còn SD Bioline Dengue IgG/IgM có vạch “G” (vạch thử Dengue IgG), “M” (vạch thử Dengue IgM) và vạch “C” (vạch chứng) . Tất cả vạch thử và vạch chứng trong cửa sổ đọc kết quả đều không nhìn thấy được trước khi nhỏ mẫu. Vạch chứng để kiểm tra quy trình xét nghiệm. Vạch chứng phải luôn xuất hiện nếu quy trình xét nghiệm được thực hiện đúng và các thuốc thử của vạch chứng phản ứng tốt.
Giá trị mong đợi
Kháng nguyên NS1 có thể được phát hiện được từ ngày thứ nhất sau khi sốt và tồn tại đến ngày thứ 9 trong cả nhiễm trùng tiên phát và nhiễm trùng thứ phát. Sốt xuất huyết tiên phát được đặc trưng bởi sự có mặt có thể phát hiện của IgM từ 3-5 ngày sau khi nhiễm. Sốt xuất huyết thứ phát được đặc trưng bởi sự tăng của IgG đặc hiệu 1-2 ngày sau khi nhiễm và trong đa số các trường hợp có kèm theo sự tăng của IgM.
Đặc tính hiệu năng
1)Độ nhạy và độ đặc hiệu Dengue NS1 Ag
Mẫu thử nghiệm được khẳng định bằng RT-PCR và/hoặc nuôi cấy vi rút.
| RT-PCR và/hoặc nuôi cấy vi rút | Tổng |
Dương tính | Âm tính |
SD Dengue NS1 Ag | Dương tính | 104 | 3 | 107 |
Âm tính | 8 | 186 | 194 |
Tổng | 112 | 189 | 301 |
Độ nhạy = 104/112 x 100 = 92.8%
Độ đặc hiệu = 186/189 x 100 = 98.4%
2)Độ nhạy và độ đặc hiệu Dengue IgG/IgM
Các kết quả so sánh của xét nghiệm SD BIOLINE Dengue IgG/IgM với xét nghiệm ức chế ngưng kết hồng cầu (HI) chỉ ra rằng xét nghiệm SD BIOLINE Dengue IgG/IgM có tương quan tốt với xét nghiệm HI.
| Xét nghiệm tham chiếu : HI | Tổng |
Dương tính | Âm tính |
SD Dengue IgG/IgM | Dương tính | 159 | 3 | 162 |
Âm tính | 1 | 39 | 40 |
Tổng | 160 | 42 | 202 |
Độ nhạy = 159/160 x 100 = 99.4%
Độ đặc hiệu = 39/42 x 100 = 93%
Kỹ thuật sử dụng | Số mẫu xét nghiệm | Chỉ dương tính với IgM | Chỉ dương tính với IgG | Dương tính với IgG+IgM
| Tổng dương tính IgM | Tổng dương tính IgG | Âm tính |
MAC-ELISA | 202 | 39 | 45 | 76 | 115 | 121 | 42 |
Test nhanh thương mại | 202 | 41 | 88 | 32 | 73 | 120 | 41 |
SD Dengue IgG/IgM | 202 | 33 | 21 | 108 | 141 | 129 | 40 |
3. Độ nhạy của xét nghiệm SD BIOLINE Dengue Duo với sự xuất hiện dấu hiệu lâm sàng
| Ngày sau khi có triệu chứng | Số mẫu | Số mẫu dương tính (%) |
Kháng thể IgG | Kháng thể IgM | Tổng Kháng thể (*1) | Kháng nguyên NS1 | Kết quả cuối cùng (*2) |
1st | 1~7 | 52 | 9(17.3) | 21(40.4) | 23(44.2) | 43(82.7) | 49(94.3) |
8~14 | 30 | 26(86.7) | 30(100) | 30(100) | 15(50) | 30(100) |
15~21 | 36 | 35(97.2) | 36(100) | 36(100) | 5(13.9) | 36(100) |
2nd | 1~7 | 36 | 24(66.7) | 8(22.2) | 24(66.7) | 24(66.7) | 32(88.9) |
8~14 | 34 | 34(100) | 18(53) | 34(100) | 14(41.2) | 34(100) |
15~21 | 42 | 42(100) | 24(57.2) | 42(100) | 3(7.2) | 42(100) |
*1 : Dengue IgG và/hoặc IgM
*2 : Dengue NS1 và/hoặc kháng thể IgG&IgM
4)Thử nghiệm phản ứng chéocủa các bệnh do muỗi hoặc do các Flavivirus khác
Xét nghiệm nhanh SD BIOLINE Dengue Duo chỉ ra rằng không có phản ứng chéo với các bệnh do muỗi hoặc các bênh qua trung gian Flavivirus khác như sốt rét.
Bệnh | Dengue IgM Âm tính/Tổng | Dengue IgG Âm tính/Tổng | Dengue NS1 Ag Âm tính/Tổng |
Viêm não Nhật Bản | 25/25 | 25/25 | 25/25 |
Sốt vàng | 25/25 | 25/25 | 25/25 |
Sốt rét P. falciparum | 25/25 | 25/25 | 25/25 |
Sốt rét P. vivax | 25/25 | 25/25 | 25/25 |
Tổng số | 100/100 | 100/100 | 100/100 |
5)Độ chính xác: Độ chính xác trong 1 lần thử nghiệm giữa các lần thử nghiệm được xác định bằng cách lặp lại 3 lần xét nghiệm của 15 mẫu thử: 6 mẫu âm tính, 3 mẫu dương tính thấp, 3 mẫu dương tính trung bình và 3 mẫu dương tính mạnh. Giá trị âm tính và dương tính được xác định chính xác trên 100% số lần xét nghiệm.
6)Để đánh giá sự tương táccủa kít chẩn đoán nhanh SD BIOLINE Dengue Duo với các mẫu gây ảnh hưởng tương thích đã biết, các mẫu có ly giải máu, các mẫu có chứa yếu tố thấp khớp, mỡ máu, chứng hoàng đản đã được sử dụng. Trong nghiên cứu cho thấy các mẫu này không gây ảnh hưởng đến kít xét nghiệm.
7)Độ nhạy phân tích(Giới hạn phát hiện): Lượng nhỏ nhất của dấu ấn đích có thể phát hiện chính xác. Kít có độ nhạy phân tích tương đương hoặc cao hơn so với xét nghiệm nhanh phát hiện kháng nguyên NS1 và kháng thể Dengue thương phẩm loại dẫn đầu.
Xét nghiệm ELISA trong chẩn đoán sốt xuất huyết
ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) hay EIA (Enzyme ImmunoAssay) là một kỹ thuật sinh hóa để phát hiện kháng thể hay kháng nguyên trong mẫu xét nghiệm. Hiện nay ELISA được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực nghiên cứu như y học, nông nghiệp và đặc biệt là trong các quy trình kiểm tra an toàn chất lượng các sản phẩm sinh học. Nguyên lý của ELISA chính là dựa vào tính đặc hiệu kháng nguyên - kháng thể và gồm các bước cơ bản như sau:
+Kháng nguyên - antigen (KN) chưa biết được gắn trên một bề mặt;
+Kháng thể - antibody (KT) biết trước được "rửa" qua bề mặt đó. Kháng thể này được gắn kết với enzyme;
+Thêm vào một cơ chất (substance); enzyme sẽ biến đổi cơ chất này và tạo tín hiệu có thể xác định được.
+Đối với các ELISA phát quang, ánh sáng sẽ được phát ra từ mẫu chứa KN-KT. Sự hiện diện của phức hợp KN-KT sẽ quyết định cường độ sáng phát ra.
Với nguyên lý trên, ELISA giúp xác định sự có mặt hay không có mặt cũng như lượng KN trong mẫu nghiên cứu. Để tiến hành ELISA cần phải có ít nhất một KT đặc hiệu cho KN chưa biết. Thông thường KN được cố định tại các giếng của vi phiến (polystyrene microtiter plate):
+Phương thức cố đinh không đặc hiệu: KN gắn trực tiếp vào bề mặt của đĩa;
+Phương thức gắn đặc hiệu ("sandwich" ELISA): KN được gắn với một kháng thể đặc hiệu cho cùng kháng nguyên cần kiểm tra;
+KT đặc hiệu sẽ được thêm vào, phản ứng tạo phức hợp KT-KN có thể sảy ra.
+Nếu KT được gắn trực tiếp với enzyme, tín hiệu quang học do enzyme làm biến đổi cơ chất sẽ giúp phát hiện KN cần kiểm tra. Trong trường hợp sử dụng KT thứ cấp (secondary antibody) được gắn với enzyme thông qua các liên kết cộng hóa trị giữa các phân tử sinh học (bioconjugation), KN cần xác định sẽ được nhận biết qua KT thứ cấp này.
+Giữa các bước của ELISA, các protein và các KT không đặc hiệu, KT không gắn với KN sẽ được lấy đi nhờ các loại dịch có tác dụng "rửa". Sau bước "rửa" cuối cùng, chỉ còn KT liên kết với KN được giữ lại. Sau khi được thêm vào, cơ chất sẽ chịu tác dụng của enzyme liên kết với KT trong phức hợp KT-KN. Phản ứng phát quang (biến đổi cơ chất) sẽ sảy ra.
Trước đây các cơ chất tạo màu sắc được sử dụng trong ELISA nhưng ngày nay các chất phát quang được dùng rộng rãi làm tăng tính đặc hiệu và độ chính xác của ELISA.
Bộ kít Mac – Elisa xét nghiệm sốt xuất huyết
Nguyên tắc
Phương pháp này nhằm mục đích xác định kháng thể IgM kháng Dengue hoặc JE có trong huyết thanh (với Dengue và JE) hoặc dịch não tủy bệnh nhân (với JE) bằng cách cho huyết thanh hoặc dịch não tủy bệnh nhân vào những giếng đã phủ sẵn kháng IgM người. Sau khi ủ và rửa những giếng này được phủ kháng nguyên của Dengue hoặc JE tiếp đó là cộng hợp IgG kháng Flavivirus gắn HRPO vào và đo lường sự đổi màu của cơ chất cho vào bằng cách đo mật độ quang (OD).
Các bước tiến hành
§Gắn kháng IgM
-Kháng IgM pha loãng 1:500 trong đệm carbonate, pH 9,6.
-Nhỏ 100 mL/giếng, để qua đêm ở 4oC.
-Rửa 3 lần bằng dung dịch PBS-Tween20 0,05%.
§Phủ bảng
-Phủ bảng bằng dung dịch PBS-sữa 5%-Tween20 0,5%
-Nhỏ 300mL/giếng.
-Ủ 1 giờ ở 37oC có ẩm độ.
-Rửa 3 lần bằng dung dịchPBS-Tween20 0,05%.
§Gắn huyết thanh
-Huyết thanh bệnh nhân pha loãng 1:100, dịch não tủy không pha loãng, trong dung dịch PBS sữa 1%.
-Nhỏ 100 mL/giếng, ủ 1 giờ ở370C có ẩm độ.
-Rửa 3 lần bằng dung dịchPBS-Tween20 0,05%.
§Gắn kháng nguyên
-Pha kháng nguyên DEN (trộn 4 kháng nguyên DEN-1, -2, -3, -4), JE theo hiệu giá đã được chuẩn độ trước. Mỗi mẫu nhỏ 2 giếng kháng nguyên DEN và 2 giếng kháng nguyên JE.
-Nhỏ 100 mL/giếng, để qua đêm ở 40C.
-Rửa 3 lần bằng dung dịch PBS-Tween20 0,05%.
§Gắn cộng hợp
-Pha loãng cộng hợp kháng Flavivirus theo hiệu giá đã chuẩn độ trong dung dịch PBS-sữa 1%.
-Nhỏ 100 mL/giếng, ủ 1 giờ ở 37oC có ẩm độ.
-Rửa 7 lần bằng dung dịch PBS-Tween20 0,05%.
§Cơ chất
-TMB-H2O2 (thể tích 1:1)
-Nhỏ 100 mL/giếng, đặt ngay trong tối, ủ nhiệt độ phòng 10 phút.
§Ngừng phản ứng
-Ngừng phản ứng bằng dung dịch H2SO4 1N
-Nhỏ H2SO4 1N 50mL/giếng
§Đọc OD ở bước sóng kép 450/620 nm.
§Tính kết quả:
-Tính ngưỡng dương tính dựa vào OD của chứng âm, được tính theo công thức.
-Ngưỡng dương tính (cutoff)=2,3 x OD chứng âm.
-OD mẫu ≥ cut-off, kết luận: Dương tính.
-OD mẫu < !important; cut-off, kết luận: Âm tính.
-Trường hợp mẫu bệnh phẩm có kết quả dương tính đồng thời với DEN và với JE thì cần so sánh tỉ số OD để kết luận dương tính với DEN hoặc JE.
(1) Trường hợp (OD DEN/cutoff DEN)/(OD JE/cutoff JE) ≥ 2, kết luận mẫu bệnh phẩm có kháng thể IgM kháng virus DEN.
(2) Trường hợp (OD JE/cutoff JE)/(OD DEN/cutoff DEN) ≥ 2, kết luận mẫu bệnh phẩm có kháng thể IgM kháng virus JE.
(3) Trường hợp tỉsốgiữa DEN và JE hoặc ngược lại trong khoảng [1, < !important;2],thì cần lấy mẫu lần thứ hai sau 7-10 ngày để khảo sát sự biến động của kháng thể, hoặc dùng kỹ thuật trung hòa để chẩn đoán phân biệt DEN và JE.
Hy vọng với phần trả lời trên, sẽ phần nào giúp bạn tham khảo về test huyết thanh chẩn đoán bạn đang cần. Một lần nữa trân trọng cảm ơn đã quan tâm đến website của Viện và chúc bạn sức khỏe!
Trương Văn Hiếu, Truonghieu_bmt@yahoo.com, buôn ma thuột –ĐĂKLĂK
Hỏi: Xin cho em được biết về một số thông tin một đợt khám bệnh, về xét nghiệm thì chi phí bệnh nhân phải trả là bao nhiêu? điều trị về bệnh sán, giun thì hết bao nhiêu tiền,....e nghe nói là tới 5 triệu ..có đúng như vậy không?
Trả lời :
Liên quan đến câu hỏi của bạn, chúng tôi xin đính chính với bạn là thông tin này không đúng sự thật, như bạn biết giun sán là những căn bệnh của các quốc gia đang phát triển hay nước nghèo thì làm gì có chi hí khám chữa bệnh cao vậy bạn nhỉ. Nếu thật sự bạn xét nghiệm tổng thể các chức năng về khám xét cơ quan trong cơ thể bạn, số tiền có thể lên đến 600.000 đến 700.000 đồng, nếu xét nghiệm chỉ mục đích kiểm tra xem mình có bị nhiễm giun sán không thì số tiền rất ít và nếu tiền thuốc cho một bệnh giun sán nào đó có thể dao động quanh 300.000 đồng. Nhìn chung, tất cả các chi phí khám, xét nghiệm và tiền thuốc hiện chúng tôi đang theo quy định của Bộ Y tế, sở y tế. Cảm ơn bạn đã rất quan tâm đến sức khỏe!
nong mai hương, thtrancaovanbmt@yahoo.com, 481 võ văn kiệt
Hỏi: tôi bị ngứa ngoài da đã gần 4 năm bình thường thì hay ngứa nổi mẩn ở mặt nhất là vùng trán, quanh đầu và cổ, vào mùa lạnh thì ngứa khắp người, bắt đầu ngứa từ tay xuống đến chân. Tôi đã đi xét nghiệm ở Phòng khám của TP Buôn Ma thuột nhưng không có kết quả. Tôi đã đi khám nhiều nơi nữa thì BS kết luận là bị dị ứng cơ địa, dị ứng thời tiết tôi đã điều trị dị ứng rất nhiều nhưng vẫn bị ngứa. Hiện nay tôi đang bị ngứa ở trán và chân tóc. Qua tìm hiểu hiện tượng bệnh của tôi giống như bị nhiễm sán chó. Vậy tôi có phải bị nhiễm sán chó không, bây giờ tôi phải làm thế nào để điều trị bệnh này. Tôi xin cảm ơn!
Trả lời : Để trả lời cho câu hỏi của bạn “Vậy tôi có phải bị nhiễm sán chó không, bây giờ tôi phải làm thế nào để điều trị bệnh này” thì chúng tôi khuyên bạn nên đến các cơ sở y tế chuyên khoa về ký sinh trùng hoặc bệnh da liễu để được khám, xét nghiệm sớm bạn nhé. Bạn có thể đến Viện Sốt rét KST-CT Quy Nhơn để đăng ký khám và điều trị cụ thể. Mong chúc bạn sẽ sớm không còn cơ ngứa hành hạ và làm khó chịu nữa.
"Hongtham Do"
Hỏi: Chào Bác sĩ! Cháu năm nay 23tuổi quê Cà Mau đang di lam cho Cty ở Cà Mau. Gần đây cháu hay bị ngứa rất khó chịu, mỗi lần ngứa cháu gảy thì thấy tại đó nổi lên một quầng nhỏ như nổi mề đay vậy. Tìm hiểu thông tin trên mạng cháu được biết trịêu chứng đó rất giống với triệu chứng bị nhiễm sán lá chó. Hiện nay cháu rất lo sợ và hoang mang không biết mình có mắc phải chứng bệnh đó không? Bác sĩ tư vấn cho cháu với, giờ cháu phải làm sao? Nếu đúng là bệnh đó thì điều trị ra sao, trong thời gian bao lâu và chi phí có cao không thưa Bác sĩ ? Thuốc điều trị bệnh này có ảnh hưởng gì tới sức khỏe không bác sĩ? Mong nhận được hồi âm sớm từ Bác sĩ! Cháu có tiền sử bệnh viêm dạ dày và bệnh trĩ hổn hợp, viêm xoang.
Trả lời: Để biết là bạn bị ngứa do căn nguyên và tác nhân gây bệnh nào thì xin vui lòng bạn đến các trung tâm chẩn đoán về bệnh da liễu và bệnh giun sán hay ký sinh trùng nói chung thì mới có thể biết được bạn đã bị nhiễm sán chó hay giun đũa chó gì đó chưa chứ không thể qua thư hay qua triệu chứng đơn giản như bạn môn tả mà phán đoán được là khó có thể bạn ạ! Thân chúc bạn khỏe!
Maihuong, do_huong1009@yahoo.com, 20lehongphongdakhakontum
Hỏi: thua bac si em bi benh ngua di ung khoang 2 nam truoc roi tu nhien het di. Toi nay em moi sinh em be dược 3 thang lai bi ngua di ung toan than rat kho chiu.gio em dang nuoi con nho moi dc 5 thang tuoi rat muon di xuong vien minh kham xem co phai minh nhiem giun hay ko. Nhung truoc het bac si cho em hoi neu em phai dieu tri giun san thi viec em uong thuoc dieu tri giun san co anh huong gi neu cho con bu hay ko? hay co thuoc nao ko anh huong den em be dang bu me ko? rat mong nhan dc tra loi som tu bac si!
Trả lời :
Nếu thật sự khi bạn đi xét nghiệm kiểm tra các bệnh lý giun sán tại viện mà phát hiện ra mình nhiễm một loại nào đó cần điều trị thì có lẽ phải dừng việc cho con bú vì một số thuốc có thể ảnh hưởng đến em bé do thuốc đi qua sữa mẹ. Nếu thật sự bệnh nghiêm trọng cần phải điều trị thì việc cần thiết bạn nên điều trị và ngưng cho cháu bú một thời gian, còn nếu không có vấn đề gì trong thời gian này bạn có thể dùng thuốc chống dị ứng loại an toàn nhất, rồi sau khi đến lúc ngưng cho con bú mới chỉ định thuốc bạn nhé.Thân chúc bạn khỏe!
nguyễn thị trinh, trinhlun89gl@gmail.com, tp pleiku - Gia lai
Hỏi: Kính chào Bác sỹ! cho cháu hỏi trong thời gian 1 năm trở lại đây cháu thường xuyên bị ngứa trên mặt, nổi mẩn đó và giống như là nổi mề đay. Cháu đi xét nghiệm tại Gia Lai thì kq là cháu bị nhiễm giun đũa chó và đang theo dõi bị sán lá gan.Sau đó cháu có đi xuống bệnh viện Ký sinh trùng Quy Nhơn Xét nghiệm thì BS xét nghiệm bảo cháu bị Sán lá gan. Sau đó cháu được uống thuốc điều trị 1 tháng và hết bị ngứa. Khoảng 3 tháng sau cháu bị ngứa trở lại. vì trước giờ da cháu ko bị dị ứng với bất kỳ loại t.phẩm hay kem phấn nào hết. Vì ko có d.kien xuống lại QN tái khám nên cháu đã xét nghiệm tại bệnh viện Đà Nẵng kết quả là:MCV=83, MCH=26.4, RDH=15.2
Fascelia, Amibelisa, Caniselisa, Gnasthoselisa, Strongelisa kết quả đều âm tính hết ạ.
BS bảo cháu ko bị giun gì cả, Vậy mà cháu cứ bị ngứa dai dẳng, nhất là khi ăn cay và trời nóng. Cháu rất lo vì ko tìm được nguyên nhân bệnh. Kính mong BS tư vấn cháu phải làm gì ạ? Cháu nghĩ cháu ko có vấn đề gì về đị ứng da hết ạ. Cháu cảm ơn Bác sỹ ạ.
Trả lời : Sau khi xét nghiệm tất cả các loại giun sán ròi mà vẫn còn ngứa trong khi các giun sán không bị (qua xét nghiệm) có thể không phải nhất thiết là bạn hoàn toàn không bị giun sán vì hiện nay có rất nhiều tác nhân giun sán gây bệnh chứ không chỉ bao nhiêu con đó, nếu có dip đi vào thành phố Hồ chí Minh, bạn nên đến các bệnh viện chuyên khoa da liễu của thành phố Hồ Chí Minh hoặc Trung tâm chẩn đoán y khoa Hòa Hảo, hoặc các bệnh viện bệnh nhiệt đới thành phố Hồ chí Minh để khám xem còn có tác nhân nào khác mà mình chữa trị luôn. Thân chúc bạn khỏe!